ボーベリア バシアーナ 培養と分生子 温度 湿度 pH

ボーベリア バシアーナ 培養を現場で再現するために、分生子の増やし方、温度・湿度・pH、紫外線対策、作業者安全まで要点を整理します。失敗しない培養設計はどこから始めますか?

ボーベリア バシアーナ 培養

この記事で得られること
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培養条件の設計図

温度・湿度・pH・紫外線など、分生子を「狙って」作るための条件を、根拠付きで組み立てます。

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固体培養と液体培養の使い分け

分生子を増やす目的なら固体培養が強い一方、液体培養は種菌づくりで効率が出ます。両者の接続がカギです。

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作業者と周辺生物の安全配慮

皮膚刺激性・感作性、ミツバチへの配慮など、農業現場での“やってはいけない”を先に押さえます。

ボーベリア バシアーナ 培養の分生子と発芽と生育

 

ボーベリア バシアーナの現場価値は、昆虫に付着した分生子が発芽し、クチクラへ侵入して増殖し、宿主死亡後に再び分生子を形成して拡散する、という循環にあります。根拠として、ボーベリア バシアーナATCC 74040の評価書でも「分生子が昆虫クチクラに付着→発芽→侵入→体内増殖→死亡後に分生子形成」という生活史が明記されています。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
つまり「培養」と言っても、菌糸量を増やすだけでは目的未達になりがちです。農業用途で狙うのは、多くの場合「散布・接触に耐える分生子を安定に出すこと」で、ここを外すと、培養物は見た目が白くても効果の再現性が落ちます。評価書では、有効成分濃度の測定にPotato Dextrose Agar(PDA)培地上のコロニー形成数(CFU)を用いることも示され、分生子(生きた増殖単位)を指標にする考え方が読み取れます。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
意外に見落とされやすいのが「分生子の質」です。たとえば、同じ数の分生子でも、乾燥耐性や紫外線耐性が弱いと、散布後に急速に失活して“効かないロット”になります。評価書には短波長紫外線では数秒程度、中長波長でも15分程度で分生子が不活性化される旨があり、紫外線が品質劣化の大きな要因だと分かります。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
また、ボーベリアは毒素としてBeauvericin等を産生することが知られており、評価書でもBeauvericinの産生が触れられています。培養条件によって二次代謝産物の出方が変わる可能性があるため、現場で自家培養する場合は「生菌数だけでなく、用途・保存・曝露経路を含めた管理」をセットで考える必要があります。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf

ボーベリア バシアーナ 培養の温度と湿度とpH

温度条件は、分生子の発芽・生育の成否を決める最重要パラメータです。評価書では、分生子の発芽・生育温度は25〜28℃が最適、33℃でわずかに生育し、36℃では発芽・生育しないと整理されています。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
この数字は、培養室の設定だけでなく、固体培養の「内部温度管理」に直結します。固体基質(米ぬか・ふすま等)で分生子を作ると、呼吸熱で中心温度が上がりやすく、室温が適温でも内部が33℃以上に跳ねることがあります。すると「白く菌糸は回ったが分生子が乗らない」「途中で増殖が止まる」といった現象が起き、温度レンジの狭さが露呈します。評価書の温度限界(33℃付近から苦しく、36℃で不可)を“安全側の設計値”として扱うと失敗が減ります。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
湿度も同様に重要で、評価書では「高湿度条件下で分生子は形成される」と明示されています。固体培養では、表面が乾きすぎると分生子形成が鈍り、逆に過湿で通気が落ちると雑菌の競合や酸欠が増えます。ここでのコツは「菌に必要な湿度」と「基質に必要な空気」を両立させることで、湿度を上げるほど良いという単純な話ではありません。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
pHについても、現場では軽視されがちです。評価書ではpH5、7、9で48時間菌糸の生存が確認されたとされ、一定の幅はありますが、培地が極端に酸性・アルカリ性に振れると他の微生物相も変わり、結果としてボーベリアが負けやすくなります。培養中のpHは、炭素源・窒素源・微量成分・汚染で動くため、初期pHだけでなく“経時変化”を観察する姿勢が品質の安定につながります。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf

ボーベリア バシアーナ 培養の固体培養と液体培養

分生子をたくさん得たいなら、一般に固体培養が主戦場になります。実務的には「液体で種菌(菌糸・短菌糸)を作り、固体へ接種して分生子化させる」流れが組みやすく、特許公報でも液体培養(例:コーンスチープリカー4%、グルコース2%等)で増殖させた後、固体培地(小麦フスマ等)に移して培養する構成が提示されています。
https://patents.google.com/patent/JP2007014296A/ja
この特許では、固体培地に滅菌水と植物油(例:ライスオイル)を加える設計が特徴で、油を加えない条件では培養7日目以後に生菌数が大きく減少し、生菌率も20%以下になった一方、油添加条件では乾燥培養物1gあたり1×10^10個以上の生菌数を維持した、というデータが示されています。ここは「意外な情報」で、炭素源を糖だけで賄うより、脂質が分生子の生残性に寄与する可能性を示唆します。
https://patents.google.com/patent/JP2007014296A/ja
ただし、油を入れれば何でも良いわけではなく、過湿・嫌気・ダマ化(局所的な通気不足)を招けば逆効果です。固体培養での現場トラブルは、だいたい次のどれかに集約されます。

 

・🌡️ 温度:内部発熱で33℃を超える(成長鈍化・停止)
・💧 水分:表面乾燥で分生子が乗らない/過湿で雑菌が勝つ
・🌬️ 通気:基質が詰まって酸欠になり、白く回っても失活する
これらは評価書が示す温度限界や「高湿度で分生子形成」という原則と整合します。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
液体培養の“落とし穴”もあります。液体は増殖効率が良い反面、目的が「分生子」なのか「短菌糸・酵母様細胞」なのかで培地設計が変わり、混同すると失敗します。評価書でも体内で短菌糸あるいは酵母様細胞として増殖する点が書かれており、増殖形態が状況で変わる菌だと理解できます。だからこそ、種菌づくり(液体)と分生子づくり(固体)を切り分け、工程全体で設計するのが再現性の近道です。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf

ボーベリア バシアーナ 培養の紫外線と保存

ボーベリア バシアーナの“効きムラ”の大きな原因は、実は培養よりも「保存〜散布までの間」に起こる失活です。評価書では、紫外線により分生子が不活性化され、短波長では7秒程度、中長波長でも15分程度で不活性化されると記されています。つまり、直射日光にさらすだけで短時間に品質が落ちる可能性があります。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
この知見を現場に落とすと、次のような運用ルールが実務的です。

 

・☀️ 乾燥中:天日乾燥は避け、遮光した風乾(または暗所の送風)を優先する
・🧴 保管:透明容器より遮光容器、袋ならアルミ蒸着など光を通しにくい素材を選ぶ
・🚜 散布:希釈液を作ったら長時間放置せず、なるべく早く散布する
・🏠 施設:散布後に施設内で二次感染が回ることもあるため、湿度・温度を“効かせる側”に寄せる
とくに遮光はコストが小さく効果が大きい“効率の良い改善点”です。紫外線が弱点であることは、評価書の記述から明確です。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
もう一つの意外な論点が「外に漏れた場合の失活」です。評価書のミツバチ影響に関する議論の中で、外へ漏れても影響がほとんど認められない理由として「紫外線で分生子が不活性化する」「外へ漏れ出しても少量で拡散する」「自然界に存在する菌」といった説明が挙げられています。つまり紫外線は“製剤の弱点”である一方、“環境中での残りにくさ”という性質にもつながります。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
この矛盾をどう扱うかが、農業従事者にとっての勘所です。日中の露地で効きにくいと感じたら、単純に「菌が悪い」と決めつけず、散布の時間帯(夕方〜夜間)、散布後の葉面滞留(展着の考え方)、そして施設なら環境制御(温度・湿度)を見直すと改善します。評価書が示す最適温度帯(25〜28℃)と高湿度での分生子形成を、散布後の圃場環境側で“再現する”発想が重要です。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf

ボーベリア バシアーナ 培養の作業者とミツバチ

自家培養を検討する場合、効果と同じくらい大事なのが「安全」と「周辺生物」です。評価書では、製剤の単回経皮投与試験で皮膚刺激性(GHS区分2)があり、皮膚感作性(アレルギー性)についても注意事項が必要と判断されています。現場では、粉立ちやミスト吸入を避け、手袋・マスク等の防護をルール化することが最低限のラインになります。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
また、ミツバチについては、評価書で接触・経口暴露を避け得る閉鎖系施設での使用に限定することで、群の維持に支障を及ぼすおそれはないとされています。さらに注意事項として「巣箱及び周辺にかからない」「受粉目的で放飼中の施設では使用を避ける」などが挙げられています。農家目線で言い換えると、ボーベリアは“IPMで使えるが、受粉昆虫が動いているタイミングと空間設計を外すと事故り得る”資材です。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
ここを逆手に取ると、独自視点として「培養設計=周辺生物リスク設計」になります。つまり、分生子を増やす工程で粉体化・飛散しやすい形にするほど、散布者や受粉昆虫の曝露リスクも増えます。そこで、
・🧤 調製:粉体を扱う作業は最小化し、湿式で移送できる工程設計にする
・🏠 使用:閉鎖系施設での使用に寄せ、開口部からの飛散を抑える
・⏱️ タイミング:受粉昆虫の活動時間帯・放飼期間を外す
といった運用が、品質と安全の両面で合理的です。評価書が示す注意事項は、単なる“お役所ルール”ではなく、作業設計のヒントになります。
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
参考:温度・湿度・pH・紫外線・安全性の根拠(生物農薬評価書の該当箇所)
https://www.env.go.jp/council/content/49wat-doj05/0309ref05.pdf
参考:固体培養での油添加など培養設計の具体例(培養方法の特許の実施例)
https://patents.google.com/patent/JP2007014296A/ja

 

 


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